Сортер клеток S3e, Bio-Rad. Обзор

16.03.2022

Сортер клеток S3e от Bio-Rad — это инновационная система сортинга с классической системой гидродинамической фокусировки, предназначенная для решения научно-прикладных задач в области сортировки клеток,в зависимости от сигнала флуоресцентной метки.

Сортер клеток S3e, Bio-Rad

Бутыли для реагентов и отходов в сортере клеток S3e

Бутыли с реагентами в сортере клеток S3e

Устройство и ключевые блоки сортера клеток S3e

Основные блоки сортера клеток S3e

Уникальние особенности сортера клеток S3e, Bio-Rad

Бережное отношение клеткам особенно чуствительными популяциям.
Заменена жидкостей без остановки прибора.
Система контроля температуры 4-37 ⁰С в загрузочной платформы с целью сохронения жизнеспособности клеток.
Постоянное премешивание образца в вортексе, в процессе сортировки.

Технология ProDrop

В приборе реализована инновационная технология ProDrop.

В проточном цитометре, оборудованном системой для сортировки клеток, проточная ячейка закреплена на пьезокристалле. При подаче на него напряжения кристалл вместе с ячейкой совершает колебания с заданной частотой, в результате чего струя жидкости с клетками разбивается на отдельные капли. Проходя сквозь заряжающее кольцо, капля может приобретать положительный или отрицательный заряд в зависимости от того, какая клетка содержится внутри капли. Пролетая мимо отклоняющих пластин, капля с клеткой притягивается к ним, выходит из основного потока и попадает в пробирку. Суть технологии ProDrop заключается в том, что после прохождения процедуры детекции и сортинга калибровочных частиц ProLine, несортированные частицы подвергаются вторичной детекции на выходе, что позволяет оценить, насколько успешно прошла процедура сортировки, и в автоматическом режиме внести коррекцию процедуры без вмешательства пользователя.

Технические характеристики сортера клеток S3e, Bio-Rad

Уровень чувствительности, событий/сек — до 100000;
частота сортировки, событий/сек — до 30000;
точность сортировки, % — более 99;
диаметр сопла, мкм — 100;
направление сортировки — 2-х линейное;
источник света — до 3 лазеров на выбор из 4 доступных (405, 488, 561, 640 нм);
детекция в 4-х флуоресцентных каналах (525/30, 586/25, 615/25, 655 нм);
чувствительность менее <125 MESF для красителей FITC и PE;
сортировка до 5 пробирок по 5 мл каждого направления селекции;
возможность сортировки в стрипованные пробирки и на предметные стекла;
для микроскопии;
минимальное разрешение, мкм — 0,5;
система охлаждения Пельтье, температурный диапазон, °C — от 4 до 37;
габариты, Ш × Г × В, см — 70 × 65 × 65.

Комплект поставки: сортер клеток S3e, лазерs 488 и 561 нм, 4 флуоресцентных детектора, калибровочный набор, контейнеры (2 шт.) для реагентов и отходов, соединительные трубки, ПО ProSort, кабель, ПК.

Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог

Развернуть все Названия полностью

Bio-Rad Сортер клеток, до 3 лазеров, до 4 флуоресцентных параметров, S3e
1451006_comp							По запросу По запросу
Сортер клеток S3e от Bio-Rad — это инновационная система сортинга с классической системой гидродинамической фокусировки, предназначенная для решения научно-прикладных задач в области сортировки клеток, в зависимости от сигнала флуоресцентной метки. В приборе реализована инновационная технология ProDrop. В проточном цитометре, оборудованном системой для сортировки клеток, проточная ячейка закреплена на пьезокристалле. При подаче на него напряжения кристалл вместе с ячейкой совершает колебания с заданной частотой, в результате чего струя жидкости с клетками разбивается на отдельные капли. Проходя сквозь заряжающее кольцо, капля может приобретать положительный или отрицательный заряд в зависимости от того, какая клетка содержится внутри капли. Пролетая мимо отклоняющих пластин, капля с клеткой притягивается к ним, выходит из основного потока и попадает в пробирку. Суть технологии ProDrop заключается в том, что после прохождения процедуры детекции и сортинга калибровочных частиц ProLine, несортированные частицы подвергаются вторичной детекции на выходе, что позволяет оценить, насколько успешно прошла процедура сортировки, и в автоматическом режиме внести коррекцию процедуры без вмешательства пользователя. Технические характеристики сортера клеток S3e Уровень чувствительности, событий/сек — до 100000; частота сортировки, событий/сек — до 30000; точность сортировки, % — более 99; диаметр сопла, мкм — 100; направление сортировки — 2-х линейное; источник света — до 3 лазеров на выбор из 4 доступных (405, 488, 561, 640 нм); детекция в 4-х флуоресцентных каналах (525/30, 586/25, 615/25, 655 нм); чувствительность менее <125 MESF для красителей FITC и PE; сортировка до 5 пробирок по 5 мл каждого направления селекции, возможность сортировки в стрипованные пробирки и на предметные стекла для микроскопии; минимальное разрешение — 0,5 мкм; система охлаждения Пельтье, температурный диапазон, °C — от 4 до 37; габариты, ШхГхВ, см — 70×65×65. Комплект поставки: сортер клеток S3e, лазерs 488 и 561 нм, 4 флуоресцентных детектора, калибровочный набор, контейнеры (2 шт.) для реагентов и отходов, соединительные трубки, ПО ProSort, кабель, ПК.

Примеры использования сортера клеток S3e, Bio-Rad

1. Естественный груз для миРНК это эксосомы, которые облегчают межклеточную коммуникацию в микросреде опухоли. Нарушение регуляции miRNA обычное явление при раке, и играет важную роль в устойчивости к химиотерапии. Опосредованный экзосомами перенос miRNA может играть важную роль устойчивости к лекарственим препаратам и служить мишенью для терапии рака. В изучению эксосомов, miRNA, сортер клеток S3e, Bio-Rad имеет критическую роль в данном случае для определения клеточного цикла.

Доставка микроРНК-155, опосредованная экзосомами, обеспечивает химиорезистентность раковых клетках полости рта к цисплатину, с помощью эпителиально-мезенхимального перехода. (Exosome mediated miR-155 delivery confers cisplatin chemoresistance in oral cancer cells via epithelial-mesenchymal transition).

2. Прокариотические и эукариотические клетки обладают собственной естественной флуоресценцией из-за присутствия флуоресцентных клеточных структурных компонентов и метаболитов. Клеточная аутофлуоресценция (AF) зависить от метаболического состояния клеток. В данной статье было изучено воздействие различных стрессоров на изменение аутофлуоресценции клеток Escherichia coli. Спектры возбуждения и испускания, а также повышенная экспрессия генов биосинтеза флавинов убедительно свидетельствуют о том, что флавины вносят основной вклад при увеличении аутофлуоресценции. Повышенная экспрессия генов, кодирующих различные флавопротеины, указывает на клеточную стратегию борьбы с тяжелыми стрессами. Наблюдаемое усиление аутофлуоресценции при стрессе — это эволюционно законсервированное явление, поскольку оно происходит не только в клетках разных видов бактерий, но также в клетках дрожжей и человека. Влияние ампициллина на прямое рассеяние света и интенсивность автофлуоресценции клеток E. Coli, а так же клеточное выживание определялось сортером клеток S3e, Bio-Rad (Bio-Rad, Hercules, USA, FL1 channel (excitation at 488 nm emission at 525/30 nm, ProSortTM software (Bio-Rad)).

Сильное нарастание аутофлюоресценции (АФ) клеток, сигнализирует о борьбе за выживанием (Strong increase in the autofluorescence of cells signals struggle for survival).

3. Контроль транскрипции зависит от активности комплексов факторов транскрипции, метилирования ДНК, динамики модификации хроматина, а также образования петель ДНК более высокого порядка. На перестройку транскрипционных сетей во время развития рака большое влияние оказывают генетические поражения и эпигенетические изменения. Выявление этих нарушенных транскриптомов позволяет открывать новые терапевтические мишени. Секвенирование РНК в настоящее время служит золотым стандартом для подробной и объективной молекулярной характеристики модельных систем как in vitro, так и in vivo. В последние годы zebrafish (Danio rerio) становится все более важной в качестве модельного организма. Эмбриональное развитие у рыбок данио происходит быстро. Разработка линий флуоресцентных репортеров рыбок данио, в которых флуоресцентный маркер управляется промотором (специфичным для определенного типа клеток), делает возможным выполнение сортировки флуоресценцией клеток – сортер клеток S3e, Bio-Rad. Таким образом можно определять клеточно-специфические транскриптомы, которые могли бы быть замаскированы при анализе РНК, полученной из целого эмбриона. Сортировка большого количества клеток (> 1 миллиона) не всегда возможна при работе с флуоресцентными репортерными эмбрионами. В зависимости от выбранного промотора флуоресцентный маркер может экспрессироваться только в небольшом количестве клеток и, таким образом, приводит к низкому выходу РНК. Учитывая важность получения достаточного количества высококачественной РНК для исследований экспрессии, было оптимизировано извлечение РНК из отсортированных с помощью сортера клеток S3e, Bio-Rad – клеток эмбрионов рыбок данио и провелена углублення оценка качества извлеченной РНК.

Очистка высококачественной РНК из отсортированных флуоресцентных клеток рыбок данио, с целью секвенирования РНК.( Purification of high-quality RNA from a small number of fluorescence activated cell sorted zebrafish cells for RNA sequencing purposes).

S3e Cell Sorter and ddSEQ Single-Cell Isolator Workflow

Рис. 1. Рабочий процесс сортировки клеток с S3e, подготовка библиотеки единичных клеток и дальнейшее секвенирование (ДНК, РНК, мРНК….)


Рис. 2. Выделения живых клеток AP (апикальных предшественников) из 15-дневных эмбрионов мышей с помощью сортера клеток S3e, Bio-Rad.	Рис. 3. Сортер клеток S3e упрощает рабочие процессы редактирования генов CRISPR-Cas9.	Рис. 4. Использование S3e для выделения Т-клеток с экспрессией CAR после трансфекции.

Мониторинг терапии CAR-t-клетками и проточная цитометрия

Рис. 5. Мониторинг терапии CAR-t-клетками.

Проекты, где использовался сортер клеток S3e, Bio-Rad

1. Исследование раковых стволовых клеток с помощью сортера клеток S3e

2. Возможные области по применению сортера клеток S3e

3. Разработка сортера клеток S3e, Bio-Rad

4. Определение прогностических биомаркеров, для успешной иммунотерапии

Узнайте, как S3e может помочь ученым открыть новые биомаркеры, которые потенциально могут стать новыми мишенями для лечения рака и других заболеваний.