Реактивы для молекулярной биологии на каждый день: на складе по специальным ценам!

Смесь водных растворов дезоксинуклеотидтрифосфатов - дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ, каждый в концентрации 2 мМ.

Особенности:

• Чистота свыше 99%, подтверждена ВЭЖХ;
• не содержат ДНК человека и E.coli;
• стабильны в течение нескольких лет при -20^оС;
• стабильны после многих циклов замораживания-размораживания ;
• стабильны в течение нескольких недель при комнатной температуре и после 30 циклов ПЦР.

Области применения:

• ПЦР фрагментов до 40 тыс. п.н.;
• синтез кДНК в реакции ОТ-ПЦР;
• ПЦР в реальном времени;
• высокоточная ПЦР;
• стандартная ПЦР.

Условия хранения: -20^оС

Водный раствор хлорида магния, отфильтрованный через мембрану 0.22 мкм. Предназначен для оптимизации условий ПЦР. Совместим со всеми полимеразами Thermo Scientific -Taq, DreamTaq, Phusion и др. Также может использоваться в качестве ко-фактора в других ферментативных реакциях.

Не содержит эндо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp II и раствором MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp I.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp I. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp II и раствором MgCl2.

Условия хранения: -20^оС

Деионизованная вода, отфильтрованная через мембрану 0.22 мкм. Предназначена для молекулярной биологии.

Не содержит экзо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 750 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C);
• 200 mM (NH₄)₂SO₄ ;
• 0.1% (v/v) Твин 20.

Условия хранения: -20^оС

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 750 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C);
• 200 mM (NH₄)₂SO₄;
• 0.1% (v/v) Tween 20;
• 20 mM MgCl₂

Условия хранения: -20°C.

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 100 мМ Tрис-HCl (pH 8.8 при +25°C)
• 500 мМ KCl
• 0.8% (об.) Nonidet P40
• 15 мМ MgCl₂

Условия хранения: -20^оС

Буфер GeneAmp I предназначен для ПЦР с ДНК-полимеразой AmpliTaq.

Содержит 15 мМ MgCl₂.

Условия хранения: -15-25^оС

Буфер GeneAmp II предназначен для ПЦР с ДНК-полимеразой AmpliTaq. Не содержит MgCl₂, раствор MgCl₂ входит в комплект в виде отдельного реагента.

Условия хранения: -15-25^оС

Taq ДНК-полимераза - термостабильная ДНК-полимераза из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент катализирует синтез ДНК в направлении 5’->3’, не обладает 3’->5’ экзонуклеазной активностью (корректирующей) и обладает низкой 5’->3’ экзонуклеазной активностью. Также обладает трансферазной активностью, что проявляется в способности присоединять дополнительный адениновый остаток к 3’-концу синтезированной цепи ДНК. Это удобно при ТА-клонировании. Время полужизни фермента при +95^оС - не менее 40 минут. Полимераза способна встраивать модифицированные нуклеотиды - биотинилированные или флуоресцентно-меченные.

Taq ДНК-полимераза - идеальный инструмент для стандартной ПЦР на последовательностях до 5 тыс. п.н.

Области применения:

• рутинная амплификация ДНК до 5 тыс. п.н.;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мечение ДНК.

Комплектуется двумя 10-кратными буферами для ПЦР - с KCl и (NH₄)₂SO₄, а также 25 мМ раствором MgCl₂.

Точность Taq ДНК-полимеразы составляет 4.5 х 104, т.е. вероятность ошибки составляет 2.2 х 10-5 на 1 цикл.

Для экспериментов с микрочипами рекомендуется использовать Taq-буфер без детергентов.

Условия хранения: -20^оС

Буфер DreamTaq Green – это 10-кратный буфер для ПЦР, оптимизированный для постановки реакции с ДНК-полимеразой DreamTaq или DreamTaq Hot Start. Буфер содержит MgCl₂ в концентрации 20 мМ, а также KCl и (NH₄)₂SO_₄ в оптимальном соотношении, что обеспечивает специфичность отжига праймеров при различных концентрациях Mg^²+.

В состав буфера входят утяжеляющий агент и два маркерных красителя для электрофореза – голубой (миграция в 1% агарозном геле на уровне 3-5 тыс. п.н.) и жёлтый (миграция в 1% агарозном геле на уровне 10 п.н.). Это позволяет наносить ПЦР-смеси на гель непосредственно после реакции, не добавляя дополнительных реагентов.

Красители имеют максимумы поглощения 424 и 615 нм соответственно. Для приложений, требующих регистрации оптической плотности или флуоресценции ПЦР-продуктов, рекомендуется использовать бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Условия хранения – - 20 °С.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) и мастер-миксы с ДНК-полимеразой Phusion – готовые 2-кратные реакционные смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,55 мМ MgCl_₂.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start Green представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, а также утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Hot Start Green.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления дополнительных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В набор входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq Hot Start.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Водные растворы дезоксинуклеотидтрифосфатов дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ, смешанные в одной пробирке в концентрации 10 мМ.

Нуклеотиды имеют чистоту 99% и тестированы на отсутствие нуклеазной активности и примесей ДНК.

Смесь удобна тем, что снижает число пипетирований при приготовлении реакционных смесей и предназначена для большинства молекулярно-биологических экспериментов. Нуклеотиды в составе смеси сохраняют свою стабильность при многократном замораживании-размораживании и при хранении при комнатной температуре до 7 недель.

Условия хранения -20^оС

Набор состоит из 4 пробирок, каждая из которых содержит 100-мМ водный раствор одного из дезоксинуклеотидтрифосфатов - дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ.

Растворы титрованы NaOH до рН 7.3 - 7.5. Нуклеотиды имеют чистоту 99% и тестированы на отсутствие нуклеазной активности и примесей ДНК. Сохраняют стабильность при многократном замораживании-оттаивании.

Набор предназначен для большинства молекулярно-биологических применений: стандартной ПЦР, ПЦР в режиме реального времени, обратной транскрипции, мечения и секвенирования ДНК.

Условия хранения -20^оС

Раствор RNAlater для стабилизации РНК в интактных, размороженных образцах тканей, устраняет необходимость немедленной обработки или замораживания образцов в жидком азоте для последующей обработки.

Особенности реагента RNAlater

Реагент RNAlater имеет следующие особенности:

• не требует заморозки тканей перед консервацией;
• сохраняет количественный и качественный состав РНК;
• сохраняет РНК 1 сутки при температуре 37°C, 1 неделю при комнатной температуре, 1 месяц при 4°C, либо любой срок при -20°C;
• совместим с любыми процедурами выделения РНК;
• тестирован на широком спектре тканей различных организмов;
• заполняет полости и органы многоклеточных организмов для инактивации РНКаз и стабилизации РНК по всему объёму ткани;
• требуется небольшой объём реагента для стабилизации РНК в образце;
• позволяет собирать образцы тканей в местах, где немедленная изоляция РНК невозможна;
• для последующего выделения РНК из образца не требуется отмывать реагент.

Условия хранения и перевозки — комнатная температура.

Обратная транскриптаза RevertAid — это рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV) с модифицированной структурой и каталитическими свойствами. Фермент обладает РНК-зависимой и ДНК-зависимой полимеразной активностью. Обратная транскриптаза RevertAid проявляет активность РНКазы Н в меньшей степени, чем обратная транскриптаза вируса миелобластоза птиц (AMV-RT).

Особенности обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid имеет следующие особенности:

• cинтезирует первую цепь кДНК до 13 тыс п.н.;
• оптимальная температура реакции +42 °С;
• активна до +50 °С;
• способна встраивать модифицированные нуклеотиды — меченые Су3, Су5, родамином родамином или флюоресцеином.
  

Области применения обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid применяется в следующих областях:

• синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
• синтез кДНК для клонирования или экспрессии белков;
• мечение ДНК для микрочипов;
• анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Комплектуется 5-кратным реакционным буфером.

Условия хранения: -20 °С.

Набор с обратной транскриптазой RevertAid - полная система для эффективного синтеза первой цепи кДНК ан РНК-матрицах. В состав набора входит обратная рестриктаза RevertAid - рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV-RT). Она активна при температурах от +42 до +50оС и способна синтезировать кДНК до 13 тыс. п.н.

В состав набора также входят: реакционный буфер, смесь дезокситрифосфатов, ингибитор РНКаз RiboLock, случайный 6-нуклеотидный праймер, олиго(дТ)18 праймер и контольный препарат - праймеры и матрица GAPDH.

Олиго(дТ)18 праймер предназначен для специфического отжига на 3’-поли(А) матричной РНК. Для обратной транскрипции 5-концов РНК и РНК без поли(А)-концов используется случайный праймер.

Также возможно использование ген-специфичных праймеров. Первая цепь кДНК может быть использована как матрица в ПЦР, ПЦР в реальном времени или для синтеза второй цепи кДНК.

Условия хранения: -20^оС

Набор с обратной транскриптазой RevertAid - полная система для эффективного синтеза первой цепи кДНК ан РНК-матрицах. В состав набора входит обратная рестриктаза RevertAid - рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV-RT). Она активна при температурах от +42 до +50оС и способна синтезировать кДНК до 13 тыс. п.н.

В состав набора также входят: реакционный буфер, смесь дезокситрифосфатов, ингибитор РНКаз RiboLock, случайный 6-нуклеотидный праймер, олиго(дТ)18 праймер и контольный препарат - праймеры и матрица GAPDH.

Олиго(дТ)₁₈ праймер предназначен для специфического отжига на 3’-поли(А) матричной РНК. Для обратной транскрипции 5-концов РНК и РНК без поли(А)-концов используется случайный праймер.

Области применения:

• Синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
• синтез полноразмерных библиотек кДНК;
• синтез антисмысловой РНК.

Условия хранения: -20^оС

Ингибитор RiboLock ингибирует активность РНКаз А, В и С по неконкурентному механизму в соотношении 1 : 1. Не ингибирует эукариотические РНКазы T1, T2, U1, U2, CL3 и прокариотические РНКазы H и I.

Работает в большинстве реакционных смесей и защищает РНК от деградации при температурах до +55^оС.

Рекомендуемая рабочая концентрация - 1 ед/мкл.

В состав буфера для хранения входит ДТТ, который обеспечивает стабильность ингибитора, но не является необходимым компонентом реакционной смеси.

Области применения:

• Предохранение РНК от деградации при транскрипции и трансляции in vitro, обратной транскрипции, амплификации РНК, выделении мРНК-протеинового комплекса из клеток млекопитающих;
• выделение и хранение РНК;
• исследование специфической РНКазной активности.

Условия хранения: -20^оС

Эндонуклеаза рестрикции Eco81I Fast Digest распознает и гидролизует сайты CC↓TNAGG при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции Eco81I Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ CC↓TNA GG 3’
	3’ GG ANT↑CC 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Температурная инактивация	за 10 минут при 80°С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	Bsu36I, AxyI, Bse21I
Хранение	-20 °С

Эндонуклеаза рестрикции XhoI Fast Digest распознает и гидролизует сайты R↓AATTY при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции XhoI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ C↓TCGA G 3’
	3’ G AGCT↑C 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	5 минут при 80 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Хранение	-20 °С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021г».

Эндонуклеаза рестрикции SalI Fast Digest распознает и гидролизует сайты G↓TCGAC при 37 °C за 5-15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции SalI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ G↓TCGA C 3’
	3’ C AGCT↑G 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	10 минут при 65 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Хранение	-20 °С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021г».

Эндонуклеаза рестрикции NotI Fast Digest распознает и гидролизует сайты GC↓GGCCGC при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции NotI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ GC↓GGCC GC 3’
	3’ GC CCGG↑CG 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	5 минут при 80 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	CciNI
Хранение	-20 °С

Примечание: cписок всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021г».

Эндонуклеаза рестрикции NheI Fast Digest распознает и гидролизует сайты G↓CTAGC при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции NheI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ G↓CTAG C 3’
	3’ C GATC↑G 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	5 минут при 65 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	AsuNHI, BmtI
Хранение	-20 °С

Примечание: cписок всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021г».

Эндонуклеаза рестрикции NcoI Fast Digest распознает и гидролизует сайты C↓CATGG при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции NcoI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ C↓CATG G 3’
	3’ G GTAC↑C 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Температурная инактивация	Нет
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	Bsp19I
Хранение	-20 °С

Примечание: cписок всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021г».

Сайт узнавания	5' T↓CTAG A 3'
	3' A GATC↑T 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер Tango
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	65 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' A↓AGCT T 3'
	3' T TCGA↑A 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер R (Red)
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер R (Red); 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' G↓AATTC 3'
	3' CTTAA↑G 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер EcoRI
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	65 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер EcoRI; 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' G↓GATC C 3'
	3' C CTAG↑G 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер BamHI
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер BamHI; 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' GC↓GGCCGC 3'
	3' CGCCGG↑CG 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер O (Orange)
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование – не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер O (Orange); 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Экзонуклеаза ExoI специфически расщепляет одноцепочечную ДНК в направлении 3'--> 5', высвобождая дезоксинуклеотид-монофосфат.

Не расщепляет цепи ДНК, 3’-конец которых блокирован фосфорильной или ацетильной группой.

Активна в ПЦР-буфере.

Области применения:

• Удаление праймеров из ПЦР-смесей, в том числе перед секвенированием;
  

• расщепление 1-цепочечной ДНК с 3’-гидроксилированными концами.

Важно! фермент не предназначен для отщепления липких 3’-концов у 2-цепочечной ДНК.

Условия хранения: -20^оС

Щелочная фосфатаза катализирует отщепление 5’- и 3’-фосфатных групп от ДНК, РНК и нуклеотидов, а также от белков.

Термочувствительная фосфатаза FastAp активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах. Она дефосфорилирует все типы концов ДНК (липкие и тупые) в течение 10 минут при +37^оС и инактивируется при +75^оС в течение 5 минут, поэтому не требуется очистка реакционной смеси перед лигированием.

Особенности щелочной фосфатазы FastAp:

• Рекомбинантный белок;
• быстрое дефосфорилирование - 10 минут;
• быстрая инактивация - 5 минут;
• можно использовать для одновременного расщепления и дефосфорилирования векторной ДНК;
• активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах;
• дефосфорилирует белки;
• используется для очистки ПЦР-смесей совместно с ExoI.

Области применения:

• Дефосфорилирование векторной ДНК при клонировании;
• очистка ПЦР-продуктов из реакционных смесей перед секвенированием;
• дефосфорилировнание 5’-концов ДНК перед мечением полинуклеотидкиназой Т4;
• другие экперименты, связанные с дефосфорилированием нуклеиновых кислот;
• дефосфорилирование белков.

Важно!

Связывание фосфатазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

Условия хранения: -20^оС

АТФ (аденозин-5’-трифосфат) — высоко стабильный нуклеотид. Предлагается в виде водного 100 мМ раствора, титрованного NaOH до рН 7.3-7.5. Чистота не менее 99%. Стабилен при -20 °С в течение нескольких лет, выдерживает многократное замораживание-оттаивание.

Области применения аденозина-5’-трифосфата

Аденозин-5’-трифосфат применяется в следующих областях:

• транскрипция in vitro;
• синтез РНК, в том числе микроРНК;
• лигирование;
• фосфорилирование.

Условия хранения: -20 °С.

ИПТГ (Изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид) - высокостабильный аналог лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и индуцирует синтез бета-галактозидазы, фермента, метаболизирующего лактозу. Используется как индуктор экспрессии генов, клонированных под контроль lac-оперона.

Также используется совместно с X-Gal для бело-голубой селекции клонов.

Рекомендуется приготовление стокового раствора в концентрации 100 мМ. Для бело-голубой селекции используется конечная концентрация 0.1 мМ.

Условия хранения: +4^оС

Современные ДНК-лигазы одинаково быстро и эффективно сшивают как липкие, так и тупые концы. Одна из таких разновидностей лигаз используется в готовых наборах для клонирования CloneJET PCR, Thermo Fisher Scientific.

Наборы CloneJET PCR – это оптимизированные системы с позитивной селекцией для эффективного клонирования ПЦР-продуктов, синтезированных любыми термостабильными ДНК-полимеразами. С помощью наборов CloneJET PCR можно клонировать ДНК-фрагменты с любыми концами – тупыми или липкими, фосфорилированными или не фосфорилированным. Лигирование занимает всего 5 минут, а выход рекомбинантных клонов составляет более 99% благодаря использованию вектора pJET1.2/blunt с позитивной системой селекции.

Примеры применения:

• клонирование продуктов ПЦР с тупым или 3'-dA-концом длиной до 10 кб;
• клонирование фрагментов ДНК, генерируемых рестрикционными ферментами;
• секвенирование клонированной ДНК;
• транскрипция in vitro и in vivo клонированных вставок из промотора T7.

Клонирование с использованием наборов CloneJET PCR включает в себя этап достройки липких концов, получающихся при использовании для ПЦР стандартной Taq-полимеразы или при рестриктазном расщеплении ДНК. При этом реакция лигирования тупоконечной вставки длиной до 3000 пар нуклеотидов с линейным вектором занимает всего 5 минут (при более длинных вставках время лигирования увеличивается). Позитивная селекция клонов со вставкой осуществляется за счёт встраивания клонируемого фрагмента в последовательность летального гена eco47IR, тем самым выключая этот ген и обеспечивая жизнеспособность рекомбинантных клонов.

Преимущества наборов CloneJET PCR:

• универсальный вариант для клонирования фрагментов с тупым или липким концами;
• быстрое клонирование ПЦР-фрагмента всего за 5 минут;
• эффективность – более 99% положительных клонов;
• отсутствие фоновых клонов с «пустым» вектором.

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

Полинуклеотидкиназа Т4 катализирует перенос гамма-фосфата от АТФ на 5’-концевую ОН-группу ДНК, РНК, олигонуклеотидов или нуклеозид-3’-монофосфатов (прямая реакция).Эта реакция обратимая. В присутствии АДФ полинуклеотидкиназа проявляет 5’-фосфатазную активность и катализирует обмен фосфатными группами между 5’-фосфорилированными полинуклеотидными цепями и АТФ (реакция обмена). Также фермент обладает 3’-фосфатазной активностью.

Полинуклеотидкиназа Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Области применения:

• Мечение 5’-концов нуклеиновых кислот с целью получения гибридизационных зондов, зондов для транскриптов, маркеров для электрофореза, праймеров для секвенирования и ПЦР;

• 5’-фосфорилирование синтетических олигонуклеотидов, ПЦР-продуктов, ДНК и РНК перед лигированием;

• выявление модификаций ДНК с помощью [³²P];

• отщепление 3’-концевых фосфатов.

Полинуклеотидкиназа Т4 Thermo Scientific комплектуется 10-кратными буферами А (для прямой реакции), В (для реакции обмена) и 24% раствором ПЭГ 6000.

Полиэтиленгликоль повышает эффективность реакции фосфорилирования и используется в реакции обмена.

Важно! Полинуклеотидкиназа ингибируется ионами аммония, поэтому при осаждении фосфорилируемой ДНК рекомендуется использовать ацетат натрия.

Условия хранения: -20^оС

Деионизованная вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК) и отфильтрованная через мембрану 0.22 мкм. Предназначена для экспериментов с использованием РНК.

Не содержит экзо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Не предназначена для ПЦР и экспериментов in vivo.

ТРИзол - готовый к использованию реагент для выделения РНК высокого качества. Также используется для выделения ДНК, РНК и белков из широкого спектра биологических образцов - тканей, клеток, жидкостей и др. Это однофазная смесь фенола и гуанидин-изотиоцианата, разработанная для выделения фракций ДНК, РНК и белков из одного и того же биологического образца.

Выполнение протокола выделения РНК с помощью ТРИзол занимает около одного часа. Реагент обеспечивает эффективный лизис и даёт возможность получения РНК высокого качества за счёт ингибирования РНКаз.

Выделение фракций ДНК, РНК и белков осуществляется с помощью добавления к ТРИзол хлороформа.

Условия хранения: при комнатной температуре

РНКаза А - эндорибонуклеаза, расщепляющая одноцепочечную РНК по цитозиновым и урациловым остаткам. Так как РНКаза А от Thermo Scientific не содержит ДНКаз, не требуется её термическая обработка перед использованием.

Области применения:

• Выделение плазмидной и геномной ДНК;
• удаление РНК из препаратов рекомбинантных белков;
• исследования защищённости от РНКаз (совместно с РНКазой Т);
• картирование 1-нуклеотидных мутаций в ДНК и РНК.

Рекомендуемая рабочая концентрация РНКазы А - от 1 до 100 мкг/мл. В присутствии NaCl в низких концетрациях (до 100 мМ) РНКаза А расщпляет 1- и 2-цепочечную РНК, а также цепь РНК в составе гибридов ДНК-РНК. В присутствии NaCl в концентрации 0.3М и выше РНКаза А расщепляет только 1-цепочечную РНК.

Условия хранения: -20^оС

Протеиназа К - эндопротеаза широкого спектра действия., расщепляющая белки даже в присутствии детергентов. Относится к классу сериновых протеаз. Протеиназа К гидролизует пептидные связи со стороны карбоксильной группы алифатических, ароматических и гидрофобных аминокислот. Минимальный размер расщепляемого пептида - 4 аминокислоты.

Протеиназа К Thermo Scientific - готовый к использованию раствор с концентрацией не менее 600 ед/мл (20 мг/мл).

Области применения:

• Выделение нуклеиновых кислот из животных тканей и клеточных культур;
• удаление ДНКаз и РНКаз в процессе выделения и очистки нуклеиновых кислот;
• определение локализации ферментов.

Рекомендуемая рабочая концентрация фермента - от 0.05 до 1 мг/мл. Активность фермента повышается в присутствии 0.2-1% SDS или 1-4 М мочевины.

Ионы кальция являются фактором регуляции связывания протеиназы К с субстратом и повышают стабильность фермента. Оптимальное значение рН - от 7.5 до 8, но белок стабилен при рН от 4 до 12. Оптимальная температура - +50-55^оС, при нагревании свыше +65^оС протеиназа К инактивируется.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Набор для экстракции из геля предназначен для выделения фрагментов ДНК из агарозного геля после электрофоретического разделения. С помощью набора можно очистить фрагменты ДНК от 25 до 20 тыс. п.н. с выходом до 95%. Ёмкость колонок GeneJET - до 25 мкг ДНК, выделяемой из 1 г агарозного геля. Выделеннная ДНК пригодна для рестрикции, лигирования, секвенирования, мечения и т.д.

Условия хранения: комнатная температура.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Данный набор предназначен для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов - культур животных клеток, животных тканей, человеческих клеток крови, бактерий и дрожжей.

С помощью набора GeneJET можно получить препарат чистой РНК (А260/280 > 1.9) с длиной фрагментов не менее 200 нуклеотидов. Полученная РНК пригодна для молекулярно-биологических экспериментов, таких, как обратная транскрипция, ОТ-ПЦР, ОТ-количественная ПЦР и гибридизация.

Условия хранения: комнатная температура

Наборы GeneJET Plasmid Miniprep предназначены для выделения плазмидной ДНК из бактерий с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния. Набор позволяет получить до 20 мкг высококопийной плазмидной ДНК за одну процедуру выделения.

Преимущества набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• процедура выделения занимает менее 14 минут;
• не требуется экстракция фенолом/хлороформом или осаждение спиртом;
• очищенная ДНК немедленно готова к использованию;
• совместим с вакуумным коллектором для увеличения пропускной способности;
• оптимизирован для выделения ДНК бактерий.

Выделенная набором GeneJET Plasmid Miniprep ДНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• рестрикции и модификации;
• автоматизированного флуоресцентного и радиоактивного секвенирования;
• ПЦР;
• in vitro транскрипции;
• трансформации.

Состав набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• раствор для ресуспендирования клеток;
• раствор для лизиса клеток; раствор для нейтрализации лизата;
• промывочный раствор (концентрат);
• раствор РНКазы А;
• буфер для элюции;
• спиновые колонки;
• трубки для сбора элюата;
• подробный протокол работы.

Культуру клеток собирают и лизируют. Затем лизат очищают центрифугированием и наносят на колонку с кремнеземом для селективного связывания молекул ДНК при высокой концентрации соли. Адсорбированную ДНК промывают для удаления загрязнений, а чистую плазмидную ДНК элюируют в небольшом объеме элюционного буфера или воды.

Условия хранения и перевозки - комнатная температура.

ДНКаза I - эндонуклеаза, расщепляющая одно- и двухцепочечную ДНК. Она гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов и монодезоксинуклеотидов с 5’-фосфатом и 3’-OH.

Так как фермент рекомбинантный, его раствор не содержит РНКаз.

Активность ДНКазы I зависит от присутствия ионов Ca²⁺ и Mg²⁺, а также Mn²⁺. В присутствии Mg²⁺ фермент расщепляет каждую цепь двухцепочечной ДНК независимо друг от друга, случайным образом. В присутствии Mn²⁺ расщепление обеих цепей двухцепочечной ДНК происходит приблизительно в одном и том же месте, при этом концы фрагментов ДНК - тупые или выступающие на 1-2 нуклеотида.

Применение:

• Получение препаратов РНК, не содержащих примеси ДНК;
• расщепление матрицы ДНК после транскрипции in vitro;
• обратная транскрипция;
• мечение ДНК методом ник-трансляции (с использованием ДНК-полимеразы I);
• изучение взаимодействий «ДНК-белок» методом футпринтинга;
• получение библиотек вставок ДНК, перекрывающихся случайным образом.

Фермент комплектуется двумя 10-кратными реакционными буферами - с MgCl₂ и без MnCl₂

Важно! ДНКаза I чувствительна к физической денатурации - не перемешивать на вортексе или пипетированием. Перемешивать только переворачиванием пробирки.

Условия хранения: -20^оС

Гликоген - полисахарид высокой степени чистоты. Выделен из двустворчатых моллюсков. Используется в качестве инертного соосадителя при преципитации нуклеиновых кислот спиртами. Он не растворим в этаноле и способствует образованию более прочного и видимого осадка нуклеиновой кислоты после центрифугирования. Гликоген более эффективен при высаживании нуклеиновых кислот, чем тРНК, линейный акриламид или фрагментированная ДНК.

Данный продукт рекомендуется в первую очередь для преципитации РНК, а также ДНК.

Идеален для преципитации олигонуклеотидов (более 8 оснований) и РНК/ДНК в низкой концентрации (20 пг и более).

Не влияет на спектральные характеристики нуклеиновых кислот.

При концентрации до 0.4 мкг/мкл совместим с трансфекцией.

При концентрации до 8 мкг/мкл совместим с ферментативными реакциями - ПЦР, лигированием, рестрикцией, синтезом кДНК, трансформацией, транскрипцией in vitro.

Не влияет на электрофоретическую подвижность нуклеиновых кислот.

Условия хранения: -20^оС

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

С помощью данного набора можно выделить геномную ДНК (длина фрагментов - свыше 30 тыс. п.н.) из культур животных клеток, образцов животных тканей, цельной крови, бактерий и дрожжей.

Выделенная ДНК пригодна для большинства молекулярно-биологических экспериментов - ПЦР, гибридизации, рестрикции и др.

Условия хранения: комнатная температура

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler Mix содержит 15 фрагментов ДНК от от 75 до 20000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 5000, 6000, 8000, 10000; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500, 1000 и 3000 п.о., что облегчает их идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp Plus содержит 14 фрагментов от 100 до 3000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 3000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500 и 1000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 1 мкл; условия хранения: при комнатной температуре или при 4 °С до 6 месяцев, более длительное хранение при -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 50bp содержит 13 фрагментов от 50 до 1000 п.н.; фрагменты: 50, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 250 и 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 1 kb содержит 14 фрагментов от 250 до 10000 п.н.; фрагменты: 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 5000, 6000, 8000, 10000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 6000, 3000 и 1000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения; хранение при – 20 °С.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp содержит 10 фрагментов от 100 до 1000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонную полосу (повышенной концентрации) при 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp содержит 10 фрагментов от от 100 до 1000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонную полосу (повышенной концентрации) при 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 1 мкл; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp Plus содержит 14 фрагментов от от 100 до 3000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 3000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500 и 1000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения для отслеживания миграции фрагментов ДНК на гель-электрофорезе; условия хранения: -20 °C.

Используется при приготовлении маркеров и образцов для нанесения на полиакриламидный или агарозный гель. Содержит два красителя (ксиленцианол FF (XCFF)) и оранжевый G/ orange G для визуализации фрагментов во время фореза, глицерин для равномерной загрузки на дно лунки и ЭДТА для связывания двухвалентных тонов металлов и ингибирования металл-зависимых протеаз. Не маскирует ДНК при УФ-экспозиции. Используется для анализа коротких фрагментов ДНК.

10 мM Tрис-HCl (pH 7,6), 0,15% оранжевый G, 0,03% ксиленцианол FF, 60% глицерин, 60 мM ЭДТА.

Применение: гель-электрофорез.

Реагент для приготовления образцов ДНК и маркеров для электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле. Содержит цветные маркерные красители Бромфеноловый синий и ксиленцианол FF для визуального контроля за миграцией фрагментов ДНК в геле. Также в состав реагента входят глицерин в качестве утяжеляющего агента и ЭДТА в качестве ингибитора нуклеаз.

Не мешает визуализации ДНК в ультрафиолете.

10 мM Tрис-HCl (pH 7,6), 0,03% бромфеноловый синий, 0,03% ксиленцианол FF, 60% глицерин, 60 мM ЭДТА.

Маркер ДНК FastRuler Low Range предназначен для быстрого определения длины и приблизительной концентрации фрагментов 2-цепочечной ДНК в специальных 48- или 96-луночных гелях для высокопроизводительного электрофореза, но может использоваться и в обычных агарозных гелях; содержит смесь пяти фрагментов ДНК с тупыми концами: 50, 200, 400, 850, 1500 п.н., которые быстро (в течение 8-14 минут) разделяются при коротком пробеге (10-20 мм) в соответствующем агарозном геле;, комплектуется 6-кратным буфером для нанесения, хотя содержит краситель и утяжеляющий агент для нанесения на гель; может быть визуализирован этидиум бромидом или SYBR Safe; условия хранения: -20 °C.